SOLIDEX®-ISOEx CD14+ раствор для выделения клеток
Введение в SOLIDEX®-ISOEx CD14+ раствор для выделения клеток
Клетки CD14+ в первую очередь относятся к моноцитам, которые являются ключевыми иммунными клетками в периферической крови и костном мозге, составляя около 5-10% лейкоцитов. Моноциты играют важную роль в врожденном иммунитете, дифференцируясь в макрофаги или дендритные клетки, участвуя в фагоцитозе патогенов, презентации антигенов, секреции цитокинов (таких как IL-6 и TNF-α) и регуляции воспаления.
Антиген CD14 входит в состав рецепторного комплекса ЛПС. Связывание антитела с CD14 не вызывает передачи сигнала, так как CD14 не имеет цитоплазматического домена. CD14 сильно экспрессируется на большинстве моноцитов и макрофагов, с более слабой экспрессией на нейтрофилах и некоторых миелоидных дендритных клетках. GeneMedi предлагает магнитные шарики для позитивной селекции или деплеции клеток CD14+, удовлетворяя различные исследовательские и терапевтические потребности.
Метод выделения SOLIDEX®-ISOEx Раствор для выделения CD14+ клеток
- Позитивная селекция
- Негативная селекция
- Деплеция
Научно-исследовательские применения:
Используется для получения макрофагов ex vivo, или для исследований цитотоксичности и миграционных тестов для оценки их функции в моделях воспаления, таких как фагоцитарная активность или механизмы миграции, индуцированной хемотаксическими факторами.
Клинические применения:
Положительная селекция CD14+ моноцитов используется для дифференцировки в дендритные клетки (ДК) для поддерживающей терапии у пациентов с плевральной мезотелиомой. Кроме того, метод применяется для приготовления клинических вакцин на основе ДК, где аутологичные ДК, загруженные мРНК CMV pp65, показали безопасность и осуществимость у здоровых добровольцев и реципиентов ТГСК, индуцируя Т-клеточные ответы против ЦМВ и тем самым способствуя предотвращению вирусной инфекции.
| Кат.№ | Наименование продукта | Информация о продукте |
|---|---|---|
| GM-Tg-hg-T23212-iso-nanoIMB | SOLIDEX®Нанобиты для выделения CD14+ клеток человека -ISOEx (на колонках) | Подробности |
| GM-Tg-hg-T23212-iso-nanoIMB-CF | SOLIDEX®-ISOEx Наночастицы для выделения человеческих CD14 (бесколоночные) | Подробности |
| GM-Tg-hg-T23212-iso-rel-kit | SOLIDEX®-ISOEx Набор для непрямого выделения клеток CD14+ человека с высвобождением (колоночный) | Подробности |
| GM-Tg-hg-T23212-iso-rel-kit-CF | SOLIDEX®-ISOEx Косвенный высвобождаемый набор для выделения CD14+ клеток человека (без колонок) | Подробнее |
| GM-Tg-hg-T23212-iso-kit | SOLIDEX®-ISOEx Косвенный набор для выделения CD14+ клеток человека (колоночный) | Подробнее |
| GM-Tg-hg-T23212-iso-kit-CF | SOLIDEX®-Набор для непрямого выделения клеток CD14+ человека ISOEx (безколоночный) | Подробности |
Применение в научных исследованиях:
Используется для выделения нативных, полностью немеченых моноцитов CD14+ для высокочувствительных последующих анализов, таких как секвенирование РНК отдельных клеток (scRNA-seq), метаболическое профилирование и эпигенетические исследования. Поскольку выделенные клетки-мишени не содержат антител и магнитных частиц, этот подход исключает риск стерического затруднения на клеточных поверхностных рецепторах и предотвращает непреднамеренную интернализацию частиц этими высокофагоцитарными клетками. Он служит золотым стандартом для моделирования нативных взаимодействий рецептор-лиганд (например, сигнального пути TLR4-LPS) и получения полностью нестимулированных моноцитарных макрофагов (MDMs) или дендритных клеток (moDCs) in vitro.
Клиническое применение:
Необходим для производства аутологичных моноцитарных терапий клинического качества, таких как персонализированные вакцины на основе дендритных клеток для онкологии или макрофаг-опосредованная иммунотерапия солидных опухолей. Благодаря использованию стратегии нетронутого выделения, конечный терапевтический клеточный продукт избегает загрязнения остаточными магнитными частицами и чужеродными антителами. Это значительно упрощает соблюдение нормативных требований cGMP, минимизирует риск иммуногенности in vivo после введения пациенту и обеспечивает оптимальную функциональную пластичность терапевтических клеток.
| Кат. № | Название продукта | Информация о продуктах |
|---|---|---|
| GM-Tg-hg-T23212-iso-kit-1 | SOLIDEX®-ISOEx Комплект для выделения нетронутых классических моноцитов человека (на колонках) | Подробности |
| GM-Tg-hg-T23212-iso-kit-CF-1 | SOLIDEX®-ISOEx Комплект для выделения нетронутых классических моноцитов человека (без колонок) | Подробности |
Научные применения:
Используется для изучения ключевой роли моноцитов в регуляции экспрессии иммунных молекул в патогенных ответах.
Клинические применения:
Удаление CD14+ клеток с последующей позитивной селекцией CD4+ T-хелперных клеток из PBMC используется для эффективного разделения CD4+ T-хелперных клеток с сильной экспрессией, что поддерживает анализ функций T-клеток или оптимизацию трансплантации. Кроме того, удаление CD14/CD25 удаляет миелоидные клетки и Tregs, повышая эффективность CAR-T-клеток при лечении рефрактерной/рецидивирующей неходжкинской лимфомы и снижая иммуносупрессию. В крупномасштабном производстве по стандартам cGMP удаление CD14+ клеток обеспечивает успешную трансдукцию и экспансию CAR-T-клеток, увеличивая чистоту и активность продукта.
| Кат. № | Наименование продукта | Информация о продуктах |
|---|---|---|
| GM-Tg-hg-T23212-dep-nanoIMB | SOLIDEX®-ISOEx наношарики для удаления CD14+ клеток человека (на колонках) | Подробнее |
| GM-Tg-hg-T23212-dep-kit | SOLIDEX®-ISOEx Непрямой набор для истощения клеток CD14+ человека (на колонках) | Подробности |
Данные валидации
Высокочистое выделение классических моноцитов из мононуклеарных клеток периферической крови человека (PBMC) с использованием SOLIDEX®-ISOEx Наночастицы для выделения CD14 человека (на колонках)
Каталожный № GM-Tg-hg-T23212-iso-nanoIMB
The SOLIDEX®-ISOEx Human CD14 Isolation Nanobeads (Column-based) использовали для выделения и очистки CD14+ моноцитов из криоконсервированных PBMC. Чистота клеточных популяций до и после выделения анализировалась с помощью проточной цитометрии. Этот эксперимент показал значительное увеличение чистоты CD14+ моноцитов с 15.2% до 93.7% при выходе 78.66%, что подтверждено проточной цитометрией.
Рисунок 13. Выделение высокой чистоты CD14+ клеток из человеческих PBMC с использованием SOLIDEX®-ISOEx Human CD14 Isolation Nanobeads (Column-based).Анализ проточной цитометрии выделенных клеток из PBMC.
Выделение высокой чистоты классических моноцитов из мононуклеарных клеток периферической крови человека (PBMC) с использованием SOLIDEX®-ISOEx Нетронутый набор для выделения классических моноцитов человека (на колонках)
Каталожный номер GM-CD14-Cell-iso-kit
В этом эксперименте SOLIDEX®-ISOEx Нетронутый набор для выделения классических моноцитов человека (на колонках) использовался для выделения и очистки классических моноцитов из криоконсервированных PBMC. Сначала немоноцитарные клетки специфически метили коктейлем из антител, конъюгированных с биотином (Antibody Cocktail), после чего инкубировали с анти-биотиновыми наномагнитными частицами. Чистоту клеточных популяций до и после выделения анализировали методом проточной цитометрии. Чистота CD14+ классических моноцитов в проточной фракции увеличилась с 21,7% до 92,1%. Результаты эксперимента показывают, что данный набор эффективно удаляет загрязняющие клетки, обеспечивая получение высокочистых, нетронутых (не связанных с антителами) классических моноцитов.
Рисунок 14. Высокочистое выделение классических моноцитов из мононуклеарных клеток периферической крови человека (PBMC) с использованием SOLIDEX®-ISOEx Нетронутый набор для выделения классических моноцитов человека (на колонках).Результаты проточной цитометрии показывают, что чистота CD14+ классических моноцитов увеличилась с 21,7% до 92,1%.